簡要描述:RKO-AS45-1人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細(xì)胞人的cDNA中編碼GADD45的開放閱讀框克隆到表達(dá)載體pCMV.3中,轉(zhuǎn)染結(jié)腸癌細(xì)胞RKO,建立了RKO-AS45-1細(xì)胞株。RKO-AS45-1細(xì)胞含有穩(wěn)定整合巨細(xì)胞病毒(CMV)啟動子的表達(dá)載體,RKO-AS45-1細(xì)胞系和它的母系RKO一起可用于GADD45對DNA修復(fù)、凋亡和藥物敏感性研究。
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品牌 | ATCC | CAS | 詳見說明書 |
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分子式 | 詳見說明書 | 純度 | 詳見說明書 |
分子量 | 詳見說明書 | 貨號 | YLK-XB0134h |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
主要用途 | 科研 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
RKO-AS45-1人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細(xì)胞
簡稱:RKO-AS45-1
中文名:人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細(xì)胞
別名:RKO-AS-45-1; RKOAS451; RKO_AS45
種屬:人
來源:結(jié)腸癌,整合起動GADD45a表達(dá)載體的CMV啟動子
培養(yǎng)基:MEM
狀態(tài):貼壁
NOTE: FOR RESEARCH USE ONLY.
細(xì)胞培養(yǎng)操作步驟:
1. 吸走多余培養(yǎng)基,加入3-5mL PBS后輕輕晃動培養(yǎng)瓶潤洗細(xì)胞;
2. 吸干凈PBS后加入1mL 0.25%胰-酶-0.53mM EDTA,輕輕搖晃培養(yǎng)皿使胰-酶浸沒細(xì)胞表面,培養(yǎng)瓶放37度培養(yǎng)箱消化;
(細(xì)胞對于消化比較敏感,消化過度會嚴(yán)重影響細(xì)胞狀態(tài),導(dǎo)致細(xì)胞傳代死亡漂浮或者傳代后不長。細(xì)胞消化到細(xì)胞間隙變大但未脫落,可以輕輕吹下時即可終止,禁止消化到細(xì)胞*漂浮。混勻細(xì)胞時盡量輕柔,不要吹出大量氣泡。)
3. 加入6-8ml*培養(yǎng)基終止消化,輕輕吹下細(xì)胞混勻;
4. 將混勻的細(xì)胞1000rpm(約150g)離心3min,棄上清,再用新鮮培養(yǎng)基重懸37度培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng);
傳代比例: 不同細(xì)胞生長速度不一,具體傳代比例視細(xì)胞生長速度而定,大部分細(xì)胞適用1:3-1:4傳代,生長較慢的細(xì)胞可以1:2傳代。
Cell cryopreservation
1.凍存液:92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(可以根據(jù)實驗室條件自行選擇)
2.降溫步驟:4度10min,-20度2h,-80過夜后液氮保存。
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