水樣中六價鉻離子(Cr6+)濃度檢測試劑盒說明書
微量法100T/96S
注 意:正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義:
Cr6+主要來自電鍍、冶煉、表面處理工業(yè)等排放的污水和廢氣。通過消化道、呼吸道、皮膚及粘膜Cr6+進入人體,造成傷害,甚至引起遺傳變異而致癌。
測定原理:
在酸性環(huán)境中,Cr6+與二苯碳酰二肼作用生成紫紅色絡(luò)合物,在540nm有特征光吸收。
自備儀器和用品:
可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、可調(diào)式移液槍、丙酮和蒸餾水。
試劑組成和配制:
試劑一:液體1.1mL×1管,室溫保存。
試劑二:粉劑×1管,4℃避光保存。臨用前加1.4 mL丙酮充分溶解,顏色變深后不能再用。
標準品:液體1mL×1管,60 nmol/mL Cr6+,室溫保存。
水樣中六價鉻離子檢測:
1. 分光光度計/酶標儀預熱30min,調(diào)節(jié)波長到540nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 標準管:取微量石英比色皿/96孔板,加入20μL標準液,180μL蒸餾水,混勻;加10μL試劑一,10μL試劑二,充分混勻;室溫下靜置10min,于540nm測定吸光度,記為A標準管。
3. 水樣測定:
(1)無色水樣直接測定:取微量石英比色皿/96孔板,加入200μL無色水樣,10μL試劑一,充分混勻;再加入10μL試劑二,充分混勻;室溫下放置10min。于540nm測定吸光度,記為A測定管。
(2)有色水樣:取微量石英比色皿/96孔板,加入200μL水樣,10μL試劑一,蓋緊混勻后置于沸水浴中2min,退色;冷卻后加10μL試劑二,充分混勻;室溫下放置10min。于540 nm測定吸光度,記為A測定管。
注意:標準管只需測定一次。
六價鉻離子濃度計算:
CCr6+(μmol/L)= C標準管÷標準品稀釋倍數(shù)×(A測定管÷A標準管) ×V總
=6000×(A測定管÷A標準管)
C標準:60nmol/mL=60 μmol/L;標準液稀釋倍數(shù):(20 μL標準液+180μL蒸餾水)÷20 μL標準液=10; V總:1L=1000 mL
注意事項:
1. 水樣中鐵約50倍于六價鉻時,產(chǎn)生黃色,干擾測定,不宜用本試劑盒進行測定;10倍于鉻的釩可產(chǎn)生干擾,但顯色20min后釩與試劑所顯色全部消失;200mg/L以上的鉬與汞有干擾;
2. 六價鉻離子為重金屬有毒離子,測定過程中應注意安全,佩戴口罩和手套,以免吸入或沾到。
3. Z低檢出限為1mmol/L。
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