使用水通道蛋白ELISA試劑盒的詳細(xì)流程

　　水通道蛋白ELISA試劑盒是一種特異性檢測試劑盒，用于定量檢測組織或細(xì)胞中水通道蛋白的表達(dá)水平。該試劑盒采用間接酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）的方法，特異性檢測水通道蛋白的抗原抗體反應(yīng)。在ELISA試劑盒中，抗原先與特異性抗體結(jié)合，隨后加入酶標(biāo)記的二抗與抗體結(jié)合，最后加入底物顯色，顏色的深淺與待測樣本中水通道蛋白的含量呈正相關(guān)。

　　水通道蛋白ELISA試劑盒的使用流程：

　　樣品準(zhǔn)備：組織或細(xì)胞樣品需用冰冷的生理鹽水或PBS洗滌三次，再用勻漿器將組織破碎或用胰蛋白酶消化細(xì)胞，制備成細(xì)胞上清液或組織勻漿液。

　　加樣：將樣品加入ELISA板中，每孔加入100μL。同時設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和空白孔。

　　孵育：將ELISA板置于37℃孵育一定時間，讓樣品與抗原充分結(jié)合。

　　洗滌：用洗滌液將未結(jié)合的物質(zhì)洗去，保證ELISA板中僅存在特異性結(jié)合的抗體和抗原。

　　加酶標(biāo)二抗：向ELISA板中加入酶標(biāo)記的二抗，每孔加入100μL。

　　孵育：將ELISA板再次置于37℃孵育一定時間，讓酶標(biāo)記的二抗與抗體充分結(jié)合。

　　洗滌：用洗滌液將未結(jié)合的物質(zhì)洗去。

　　加底物：向ELISA板中加入底物溶液，每孔加入100μL。

　　測定：用酶標(biāo)儀測定ELISA板中各孔的光密度值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品曲線計算待測樣本中水通道蛋白的含量。

　　水通道蛋白ELISA試劑盒使用要求如下：

　　試劑盒應(yīng)從冰箱取出后在室溫下平衡一段時間后再使用。

　　加樣時應(yīng)準(zhǔn)確、迅速，避免樣品外溢或產(chǎn)生氣泡。

　　孵育時應(yīng)注意溫度和時間，以保證抗原抗體充分結(jié)合。

　　洗滌時應(yīng)保證每孔充分洗滌，避免殘留物影響檢測結(jié)果。

　　加底物時應(yīng)避免氣泡產(chǎn)生，影響光吸收值。

　　試劑盒中各組分不得交叉污染，否則會導(dǎo)致檢測結(jié)果異常。