什么是細(xì)胞培養(yǎng)?
細(xì)胞培養(yǎng)是指從動(dòng)物或植物中取出細(xì)胞,然后使其在合適的人工環(huán)境中生長。這些細(xì)胞可于培養(yǎng)前直接從組織中取出并采用酶或機(jī)械方法進(jìn)行解離,或者也可來自已經(jīng)建立的細(xì)胞系或細(xì)胞株。
原代培養(yǎng)
原代培養(yǎng)是指將細(xì)胞從組織中分離后,使其在合適的條件下增殖直到占據(jù)所有可用基質(zhì) (即:達(dá)到匯合狀態(tài))的培養(yǎng)階段。在此階段,必須將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到新的容器中并更換新鮮培養(yǎng)基,從而對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代培養(yǎng),為其提供更多繼續(xù)生長的空間。
細(xì)胞系
首-次傳代培養(yǎng)后,原代培養(yǎng)物即被稱為細(xì)胞系或者亞克隆。來自于原代培養(yǎng)的細(xì)胞系 壽命有限(即:有限細(xì)胞系,見下文),隨著細(xì)胞的傳代,生長能力*的細(xì)胞會(huì)占據(jù)優(yōu) 勢,最終導(dǎo)致細(xì)胞群體在基因型和表型上達(dá)到一定程度的均一性。
細(xì)胞株
如果將細(xì)胞系的一個(gè)亞群通過克隆或者其他方法從培養(yǎng)物中明確地選擇出來,則此細(xì)胞 系就成為一個(gè)細(xì)胞株。與親代細(xì)胞系起始時(shí)相比,細(xì)胞株往往會(huì)獲得其他一些遺傳學(xué) 改變。
有限細(xì)胞系 與連續(xù)細(xì)胞系
正常細(xì)胞通常只能分裂有限的次數(shù),隨后就會(huì)喪失增殖的能力,這是一個(gè)由遺傳決定的 事件,被稱為衰老;這種細(xì)胞系被稱為有限細(xì)胞系。但是,一些細(xì)胞系會(huì)通過被稱為 轉(zhuǎn)化的過程變?yōu)橛郎约?xì)胞系,這一過程可自然發(fā)生,也可經(jīng)化學(xué)或病毒誘導(dǎo)發(fā)生。有 限細(xì)胞系發(fā)生轉(zhuǎn)化獲得無限分裂能力后,就成為連續(xù)細(xì)胞系。
培養(yǎng)條件
各種細(xì)胞的培養(yǎng)條件相差很大,但是細(xì)胞培養(yǎng)的人工環(huán)境必須包括合適的容器,容器中 含有一定的基質(zhì)或介質(zhì),為細(xì)胞提供必需的營養(yǎng)素(氨基酸、碳水化合物、維生素、礦物 質(zhì))、生長因子、激素和氣體(。2、CO2),并可調(diào)節(jié)其物理化學(xué)環(huán)境(pH、滲透壓、溫度)。 大多數(shù)細(xì)胞均具有貼壁依賴性,必須貼附在固體或半固體基質(zhì)上培養(yǎng)(貼壁或者單層培養(yǎng)), 而另一些細(xì)胞則可在培養(yǎng)基中漂浮生長(懸浮培養(yǎng))。
凍存
如果傳代時(shí)有多余的細(xì)胞,可通過適當(dāng)?shù)谋Wo(hù)劑(例如:DMSO或甘油)處理細(xì)胞,儲(chǔ)存 在-130°C以下的溫度下(凍存),直到需要使用之時(shí)。
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